《长夜难眠》是一部35集的悬疑情感短剧，以深夜电台为背景展开。女主播林晚在主持情感倾诉节目时，意外收到一封自称"35号听众"的匿名信，信中内容竟与十年前父亲离奇死亡案高度吻合。随着每集一封新信的出现，林晚与刑警队长周默联手调查，发现案件牵扯出医药集团非法实验、医院内部腐败等多重黑幕。剧中穿插着林晚与周默从互相猜忌到生死相托的情感变化，以及电台同事间错综复杂的关系网。每集结尾的"长夜提示"都为下一集埋下新悬念，最终揭晓的真相令人唏嘘不已。